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Rei Ayanami -"El que se odia a sí mismo, no puede agradar a los demás ni tampoco confiar en nadie"-

Es la Primera Niña elegida por el Instituto Marduk, designada como piloto del Evangelion Unidad 00

Rei

Los únicos datos que se tienen sobre el pasado de Rei, es que nació el mismo día en el que ocurrió el Segundo Impacto, catástrofe que elimino a más de la mitad de la vida en la tierra.

Posterior a eso, la primera aparición de Rei frente a Shinji, es en el día del ataque del primer ángel, ante la negativa de Shinji a subirse al Eva 01, Gendo la envía en su reemplazo a pesar de su grave estado tras la prueba fallida con la Unidad-00; aunque al final Shinji acepta. Shinji comienza a sentir interés por ella, dado a que ambos son pilotos, van a la misma clase y ella tiene mejor relación con Gnedo que la que tiene Shinji con su padre. Se muestra sumisa y dócil, con sentimientos reprimidos, pero muestra su enojo al escuchar a Shinji criticar a su padre, generando un cierto respeto por parte de Shinji hacia ella,

En el ataque de un ángel, Misato realiza un plan de ataque que involucra a ambos Evas. El ángel es destruido, la Unidad-00 es severamente dañada, y Shinji, preocupado por el estado de Rei, abre la capsula, quemándose levemente las manos en el proceso, y Rei, en agradecimiento a su preocupación, le expresa una sonrisa y un agradecimiento a Shinji.

Luego de un tiempo, Asuka Langley Sohryu se une al equipo e intenta interactuar con Rei, pero se muestra inexpresiva ante la nueva piloto. "Seré tu amiga, si me ordenan serlo". Luego de varios enfrentamientos éxitos contra otros ángeles, Rei comienza a ser ligeramente más expresiva luego de que Asuka la cataloga como "La muñeca del comandante"

En un enfrentamiento contra un ángel, Rei queda en desventaja y Shinji es enviado a salvarla. El ángel comienza a contaminar a la Unidad-00 y Rei en un acto por evitar una falla grave decide activar la secuencia de auto-destrucción del EVA. Provocando la destrucción del ángel, de la Unidad-00, gran parte de Tokyo 3 y su propia muerte.